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不同压力与辅料蒸制何首乌的比较研究

                 作者:罗跃龙,王晨晖,杨梓懿,刘平安 

【摘要】  目的 比较何首乌加压与常压、加辅料与不加辅料炮制的差异。方法 以二苯乙烯苷、大黄素(HPLC法定量)的含量为评价指标,采用正交设计优选加压清蒸工艺,并以加压加辅料蒸与《药典》的常压加辅料蒸进行比较研究。结果 加压清蒸工艺为A2B2C3,加压蒸制品与常压蒸制品比较,2种成分含量均高于常压蒸品;加辅料蒸比清蒸好,且以黄酒黑豆汁加压蒸法最好。结论 加压炮制何首乌可行,炖法优于蒸法,古人用黑豆蒸制首乌科学。

【关键词】  何首乌;加压炮制;二苯乙烯苷;大黄素

     何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb的干燥块根。生首乌味苦、涩,性平,具有润肠通便、解毒消肿和截疟之功;制首乌味苦、甘、涩,性温,具有补肝肾、益精血、壮筋骨、乌须发之功。已知主要有效成分为二苯乙烯苷和蒽醌类成分。历代记载的何首乌炮制方法众多,约有30多种,如蒸制、黑豆制、黑豆酒制等[1]。本实验以二苯乙烯苷、大黄素含量为指标,考察何首乌加压清蒸的最佳工艺条件;并在此工艺条件下,对加压清蒸、加压加不同辅料蒸与药典法进行比较研究,现报道如下。

    1 实验材料

    1.1  药材

    采自湖南省湘西自治州龙山县,经药物鉴定教研室鉴定为何首乌Polygonum multiflorum Thunb,将药材洗净、切丁、干燥备用。

    1.2  仪器

    KNAUER高效液相色谱议Eurochrom2000(德国诺尔仪器制造厂);SK3300H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);EDX-35B型座式自动电热压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂);FW100型粉碎机(天津市泰斯仪器有限公司);AR1140电子分析天平(奥豪斯国际莫伊有限公司)。

    1.3  试药

    二苯乙烯苷(批号110844-200404,中国药品生物制品检定所);大黄素(批号110756-200110,中国药品生物制品检定所);乙醇、甲醇为色谱纯,其余均为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1  加压清蒸工艺的优选

    2.1.1  正交设计  根据预试验与文献资料,影响清蒸工艺的因素主要有:蒸制压力、时间及饮片规格,每个因素设3水平,采用L9(34)正交表进行高压清蒸工艺的优选,因素与水平见表1(饮片规格按市售何首乌饮片分为3种:小规格边长约0.5 cm的丁块、中规格边长约1.0 cm的丁块、大规格边长约1.5 cm的丁块)。

    2.1.2  高压清蒸品的制备  取生何首乌适量,加入60%的水焖润6 h至透心,依表1分别加压蒸制,干燥备用。

    2.1.3  二苯乙烯苷的测定[2]  ①色谱条件:ODSC18色谱柱(3.9 mm×150 mm,5 ?滋m),流动相乙睛-水(25∶75),流速1.0 mL/min,检测波长:320 nm,柱温20 ℃。②对照品溶液的制备和线性关系的考察:精密称取二苯乙烯苷对照品4.1 mg置于10 mL的棕色容量瓶中,加50%乙醇配制成0.41 mg/mL的对照品溶液,分别精密吸取2,4,6,8,10 ?滋L,注入液相色谱仪,测定吸收峰面积,以测得的峰面积积分值为纵坐标,进样量(?滋g)为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程:

    Y=38.468X+4.261,r=0.999 3

    表明二苯乙烯苷在0.82~4.1 ?滋g与峰面积积分值具有良好的线性关系。③供试品溶液的制备:取各供试品(粉碎过四号筛)各约0.4 g,精密称定,精密加入50%乙醇50 mL,称定质量,加热回流30 min,放冷,再称定质量,用50%乙醇补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,0.45 ?滋m微孔滤膜滤过,至棕色容量瓶中备用。④回收率试验:精密称取已知含量的样品5份,每份约0.4 g,精密称定,分别精密加入配制的二苯乙烯苷对照品溶液10 mL,按供试品溶液制备项下方法制备,依法测定含量,计算回收率为99.83%,RSD为0.86%。⑤供试品含量测定  精密吸取供试品溶液10 ?滋L注入液相色谱仪,测定峰面积,计算样品中二苯乙烯苷含量,结果见表2。

    2.1.4  大黄素含量的测定[3]  ①色谱条件  ODSC18色谱柱(150 mm×3.9 mm,5 ?滋m),流动相:0.1%磷酸-甲醇(20∶80),流量:1.0 mL/min,检测波长:254 nm,柱温20 ℃。②对照品溶液的制备和线性关系的考察:精密称取大黄素对照品3.90 mg置于50 mL的棕色容量瓶中,加甲醇溶解成0.078 mg/mL的对照品溶液,分别精密吸取2、4、6、8、10 ?滋L,注入液相色谱仪,测定吸收峰面积,以测得的峰面积积分值为纵坐标,进样量(?滋g)为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程:

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