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痛风灵胶囊镇痛作用及机制初探

                     作者:唐春萍,江涛 ,龚梦鹃,杨超燕,肖逸翔,霍敏健 

【摘要】  目的 观察痛风灵胶囊的镇痛效果,并探讨其作用机制。 方法 采用热刺激引起小鼠疼痛反应法、冰醋酸刺激引起小鼠扭体反应法,以及甲醛法引起小鼠足疼痛反应,观察其镇痛作用,并采用甲醛疼痛模型观察其对炎症局部组织中前列腺素(PGE2)的影响。 结果 痛风灵胶囊可以明显抑制醋酸导致的小鼠扭体反应, 但对热刺激所致小鼠疼痛无明显镇痛作用,对甲醛所致小鼠第二相反应有明显抑制,降低炎症组织中的PGE2含量。结论 痛风灵胶囊对外周性疼痛有明显的镇痛作用,其机制与抑制炎症组织中PGE2生成有关。

【关键词】  痛风灵胶囊;镇痛;前列腺素E2

  Abstract:Objective To investigate the analgesic effects and mechanism of Tongfengling(TFL) capsules. Methods  Analgesic effects of TFL were observed with pain model mice induced with hot plate, writhing response induced with acetic acid and mouse formalin test. The content of PGE 2 was measured in mouse formalin test. Results TFL capsules could not elevate the pain threshold, but could inhibit writhing response and second phase of formalin test in mice, decreased the concentration of PGE2 in mouse formalin test. Conclusion TFL capsules has obvious analgesic effects, which was related to its inhibitory effects on peripheral inflammatory mediators PGE2.

  Key words:Tongfengling capsules ; analgesic effect;  prostaglandin(PGE2)

  近年来,随着人民生活水平的提高,饮食结构的改变,痛风的发病率呈现出不断上升的趋势,给人们的生活与工作带来极大的不便。痛风灵胶囊主要由秦艽、防己、延胡索等组成,经临床证实有明显的镇痛疗效。为此笔者对痛风灵胶囊的镇痛效果进行实验研究,并探讨其镇痛的作用机制。

  1  实验材料

  1.1  实验动物NIH小鼠,由广东省医学实验动物中心提供(合格证号:2006A017),符合SPF级标准。

  1.2  药物及试剂痛风灵胶囊:本院中药药理教研室提供,批号:20050702。冰醋酸:广东光华化学厂有限公司,批号:20041214。甲醛:汕头市光华化学厂,批号:20040316。罗通定片(30 mg/片):广州康和药业有限公司,批号:041001。吲哚美辛肠溶片(25 mg/片):广东华南药业有限公司,批号:050801。

  1.3  主要仪器YLS-6A型智能热板仪(山东省医学科学院设备站);UV-1800紫外-可见分光光度计(北京瑞利分析有限公司)。

  2  方法

  2.1  对热刺激引起的小鼠疼痛反应的影响[1]  取雌性NIH小鼠,体质量18~22 g,依次放入热板内,仔细观察并记录自放入热板至出现舔后足所需时间作为该鼠的痛阈值。凡舔后足时间小于5 s或大于30 s者则弃之,共测2次,取平均值作为给药前痛阈值。将筛选合格的小鼠48只随机分为4组,分别以生理盐水、罗通定、痛风灵胶囊高剂量、低剂量灌胃,给药容积为20 mL/kg,1次/d,连续给药5 d,末次给药后1 h、2 h测量痛阈值,比较各组的差异。

  2.2  对冰醋酸引起的小鼠扭体反应的影响[2]  取NIH小鼠64只,雌雄各半,体质量18~22 g,随机分为4组,分别以生理盐水、吲哚美辛、痛风灵胶囊高剂量、 低剂量灌胃,给药容积为20 mL/kg,1次/d,连续给药5 d,于末次给药后1 h,分别由腹腔注射0.6%醋酸(0.2 mL/只)。观察15 min内出现扭体反应的次数,比较各组差异。

  2.3  对甲醛法小鼠疼痛强度的影响[1]  取NIH小鼠48只,雌雄各半,体质量18~22 g,随机分成4组,即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、痛风灵胶囊高、低剂量组。各实验组小鼠每日灌胃给药1次,给药容积为20 mL/kg,对照组给予等量的生理盐水,连续5 d,末次给药后1 h,各小鼠右后足跖皮下注射2.5%甲醛生理盐水溶液50 μL/只,立即观察1 min,10 min,20 min,30 min,40 min时的疼痛反应,每时间段观察45 s,记录该45 s内出现的最高痛级,并按分级标准评定受试动物的疼痛强度,比较组间差异。评分方法:舔、咬或抖足3分,提足2分,跛行1分,走动自如0分。

  2.4  对甲醛致小鼠足肿胀组织中PGE2含量的影响[2]  取NIH小鼠48只,雌雄各半,体质量18~22 g,随机分成4组,即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、痛风灵胶囊高、低剂量组,各实验组小鼠每日灌胃给药一次,给药容积为20 mL/kg,对照组给予等量的生理盐水,连续5 d,末次给药后1 h,各小鼠右后足跖皮下注射2.5%甲醛生理盐水溶液50 μL /只,24 h后处死小鼠,距右踝关节上1 cm处剪下右足, 称重, 剥皮后浸泡于5 mL生理盐水中1 h, 以1 500 r/min离心10 min,吸取上清液0.5 mL,加入05 mol/L氢氧化钠-甲醇溶液2 mL,在50 ℃水浴箱中水浴异构化20 min,加甲醇稀释至20 mL,于紫外分光光度计278 nm处测定吸收值,并按下述公式计算PGE2含量:PGE2含量(μg/g)=(E278×13.13×Vt×D)/W。比较各组间差异[注:Vt=PGE2浸泡液总体积,D=稀释倍数,W=右下肢重量(g), E278=278 nm处的吸收值)]。

  2.4  统计学处理采用SPSS 11.5统计软件包进行方差齐性检验、方差分析(ANOVA),以P<0.05为差异有显著性。

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